V čistých priestoroch existujú dva hlavné zdroje kontaminácie: častice a mikroorganizmy, ktoré môžu byť spôsobené ľudskými a environmentálnymi faktormi alebo súvisiacimi činnosťami v procese. Napriek maximálnemu úsiliu kontaminácia stále preniká do čistých priestorov. Medzi bežné nosiče kontaminácie patria ľudské telá (bunky, vlasy), environmentálne faktory, ako je prach, dym, hmla alebo zariadenia (laboratórne zariadenia, čistiace zariadenia), a nesprávne techniky utierania a čistenia.
Najčastejším prenášačom kontaminácie sú ľudia. Aj pri nosení najprísnejšieho oblečenia a najprísnejších prevádzkových postupov predstavujú nedostatočne vyškolení operátori najväčšiu hrozbu kontaminácie v čistých priestoroch. Zamestnanci, ktorí nedodržiavajú pokyny pre čisté priestory, sú vysoko rizikovým faktorom. Pokiaľ jeden zamestnanec urobí chybu alebo zabudne na nejaký krok, povedie to ku kontaminácii celého čistého priestoru. Spoločnosť môže zabezpečiť čistotu čistého priestoru iba neustálym monitorovaním a neustálou aktualizáciou školení s nulovou mierou kontaminácie.
Ďalšími hlavnými zdrojmi kontaminácie sú nástroje a zariadenia. Ak sa vozík alebo stroj pred vstupom do čistej miestnosti len hrubo utrie, môže sa doň dostať mikroorganizmy. Pracovníci si často neuvedomujú, že kolesové zariadenia sa pri vkladaní do čistej miestnosti prevaľujú po kontaminovaných povrchoch. Povrchy (vrátane podláh, stien, zariadení atď.) sa bežne testujú na počet životaschopných baktérií pomocou špeciálne navrhnutých kontaktných platní obsahujúcich rastové médiá, ako je Trypticase Soy Agar (TSA) a Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA je rastové médium určené pre baktérie a SDA je rastové médium určené pre plesne a kvasinky. TSA a SDA sa zvyčajne inkubujú pri rôznych teplotách, pričom TSA je vystavené teplotám v rozmedzí 30 – 35 °C, čo je optimálna rastová teplota pre väčšinu baktérií. Rozsah 20 – 25 °C je optimálny pre väčšinu druhov plesní a kvasiniek.
Prúdenie vzduchu bolo kedysi častou príčinou kontaminácie, ale dnešné systémy HVAC pre čisté priestory prakticky eliminovali kontamináciu vzduchu. Vzduch v čistých priestoroch je pravidelne kontrolovaný a monitorovaný (napr. denne, týždenne, štvrťročne) z hľadiska počtu častíc, počtu životaschopných častíc, teploty a vlhkosti. HEPA filtre sa používajú na reguláciu počtu častíc vo vzduchu a dokážu filtrovať častice až do veľkosti 0,2 µm. Tieto filtre sú zvyčajne udržiavané v nepretržitej prevádzke s kalibrovaným prietokom, aby sa udržala kvalita vzduchu v miestnosti. Vlhkosť sa zvyčajne udržiava na nízkej úrovni, aby sa zabránilo množeniu mikroorganizmov, ako sú baktérie a plesne, ktoré uprednostňujú vlhké prostredie.
V skutočnosti je najvyšším a najčastejším zdrojom kontaminácie v čistých priestoroch operátor.
Zdroje a vstupné cesty kontaminácie sa v jednotlivých odvetviach výrazne nelíšia, ale medzi odvetviami existujú rozdiely, pokiaľ ide o prípustnú a neprípustnú úroveň kontaminácie. Napríklad výrobcovia tabliet na prehĺtanie nemusia udržiavať rovnakú úroveň čistoty ako výrobcovia injekčných látok, ktoré sa priamo podávajú do ľudského tela.
Výrobcovia farmaceutických výrobkov majú nižšiu toleranciu voči mikrobiálnej kontaminácii ako výrobcovia high-tech elektroniky. Výrobcovia polovodičov, ktorí vyrábajú mikroskopické produkty, nemôžu akceptovať žiadnu kontamináciu časticami, aby zabezpečili funkčnosť produktu. Preto sa tieto spoločnosti zaujímajú iba o sterilitu produktu, ktorý sa má implantovať do ľudského tela, a o funkčnosť čipu alebo mobilného telefónu. Relatívne menej sa obávajú plesní, húb alebo iných foriem mikrobiálnej kontaminácie v čistých priestoroch. Na druhej strane, farmaceutické spoločnosti sa obávajú všetkých živých aj mŕtvych zdrojov kontaminácie.
Farmaceutický priemysel je regulovaný Úradom pre kontrolu potravín a liečiv (FDA) a musí prísne dodržiavať predpisy správnej výrobnej praxe (GMP), pretože následky kontaminácie vo farmaceutickom priemysle sú veľmi škodlivé. Výrobcovia liekov musia nielen zabezpečiť, aby ich výrobky neobsahovali baktérie, ale musia mať aj dokumentáciu a sledovať všetko. Spoločnosť vyrábajúca high-tech zariadenia môže dodať notebook alebo televízor, pokiaľ prejde interným auditom. Pre farmaceutický priemysel to však nie je také jednoduché, a preto je pre spoločnosť nevyhnutné mať, používať a dokumentovať prevádzkové postupy čistých priestorov. Z dôvodu nákladových dôvodov si mnoho spoločností najíma externé profesionálne upratovacie služby.
Komplexný program testovania prostredia v čistých priestoroch by mal zahŕňať viditeľné aj neviditeľné častice prenášané vzduchom. Hoci neexistuje požiadavka, aby všetky kontaminanty v týchto kontrolovaných prostrediach boli identifikované mikroorganizmami, program kontroly prostredia by mal zahŕňať primeranú úroveň bakteriálnej identifikácie extraktov vzoriek. V súčasnosti je k dispozícii mnoho metód bakteriálnej identifikácie.
Prvým krokom pri identifikácii baktérií, najmä pokiaľ ide o izoláciu v čistých priestoroch, je Gramovo farbenie, pretože môže poskytnúť interpretačné indície o zdroji mikrobiálnej kontaminácie. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia preukáže grampozitívne koky, kontaminácia mohla pochádzať od ľudí. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia preukáže grampozitívne tyčinky, kontaminácia mohla pochádzať z prachu alebo kmeňov odolných voči dezinfekčným prostriedkom. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia preukáže gramnegatívne tyčinky, zdrojom kontaminácie mohla byť voda alebo akýkoľvek mokrý povrch.
Mikrobiálna identifikácia vo farmaceutických čistých priestoroch je veľmi dôležitá, pretože súvisí s mnohými aspektmi zabezpečenia kvality, ako sú biologické testy vo výrobnom prostredí; testovanie bakteriálnej identifikácie konečných produktov; nemenované organizmy v sterilných produktoch a vode; kontrola kvality technológie fermentačného skladovania v biotechnologickom priemysle; a overovanie mikrobiálnych testov počas validácie. Metóda FDA na potvrdenie, že baktérie môžu prežiť v špecifickom prostredí, sa stane čoraz bežnejšou. Keď úrovne mikrobiálnej kontaminácie prekročia stanovenú úroveň alebo výsledky testov sterility naznačujú kontamináciu, je potrebné overiť účinnosť čistiacich a dezinfekčných prostriedkov a eliminovať identifikáciu zdrojov kontaminácie.
Existujú dve metódy na monitorovanie povrchov v čistých priestoroch:
1. Kontaktné dosky
Tieto špeciálne kultivačné misky obsahujú sterilné rastové médium, ktoré je pripravené tak, aby siahalo vyššie ako okraj misky. Kryt kontaktnej platne zakrýva povrch, z ktorého sa má odobrať vzorka, a všetky mikroorganizmy viditeľné na povrchu priľnú k povrchu agaru a inkubujú sa. Táto technika umožňuje zobraziť počet mikroorganizmov viditeľných na povrchu.
2. Metóda tampónu
Toto je sterilné a uchováva sa vo vhodnej sterilnej tekutine. Tampón sa aplikuje na testovaný povrch a mikroorganizmus sa identifikuje jeho zachytením v médiu. Tampóny sa často používajú na nerovných povrchoch alebo v oblastiach, z ktorých je ťažké odobrať vzorky kontaktnou platňou. Odber vzoriek tampónom je skôr kvalitatívny test.
Čas uverejnenia: 21. októbra 2024