• page_banner

VÝZNAM IDENTIFIKÁCIE BAKTÉRIÍ V ČISTEJ MIESTNOSTI

čistý priestor
systém čistých priestorov

V čistých priestoroch existujú dva hlavné zdroje kontaminácie: častice a mikroorganizmy, ktoré môžu byť spôsobené ľudskými a environmentálnymi faktormi alebo súvisiacimi činnosťami v procese. Napriek maximálnemu úsiliu bude kontaminácia stále prenikať do čistých priestorov. Špecifické bežné nosiče kontaminácie zahŕňajú ľudské telá (bunky, vlasy), faktory prostredia, ako je prach, dym, hmla alebo vybavenie (laboratórne vybavenie, čistiace zariadenia) a nesprávne techniky utierania a metódy čistenia.

Najčastejším prenášačom kontaminácie sú ľudia. Aj pri najprísnejšom oblečení a najprísnejších prevádzkových postupoch je najväčšou hrozbou kontaminácie v čistých priestoroch nesprávne vyškolená obsluha. Zamestnanci, ktorí nedodržiavajú pokyny pre čisté priestory, sú vysoko rizikovým faktorom. Pokiaľ sa jeden zamestnanec pomýli alebo zabudne na krok, povedie to ku kontaminácii celej čistej miestnosti. Spoločnosť môže zabezpečiť čistotu čistých priestorov len neustálym monitorovaním a neustálou aktualizáciou školení s nulovou mierou kontaminácie.

Ďalšími hlavnými zdrojmi kontaminácie sú nástroje a vybavenie. Ak vozík alebo stroj pred vstupom do čistej miestnosti len nahrubo utriete, môže to priniesť mikroorganizmy. Pracovníci si často neuvedomujú, že kolesové zariadenia sa prevaľujú po kontaminovaných povrchoch, keď sa tlačia do čistej miestnosti. Povrchy (vrátane podláh, stien, vybavenia atď.) sa rutinne testujú na životaschopnosť pomocou špeciálne navrhnutých kontaktných platní obsahujúcich rastové médiá, ako je Trypticase Soy Agar (TSA) a Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA je rastové médium určené pre baktérie a SDA je rastové médium určené pre plesne a kvasinky. TSA a SDA sa zvyčajne inkubujú pri rôznych teplotách, pričom TSA sú vystavené teplotám v rozsahu 30-35˚C, čo je optimálna teplota rastu pre väčšinu baktérií. Rozsah 20-25˚C je optimálny pre väčšinu druhov plesní a kvasiniek.

Prúdenie vzduchu bolo kedysi bežnou príčinou kontaminácie, ale dnešné systémy HVAC v čistých priestoroch prakticky eliminovali kontamináciu vzduchu. Vzduch v čistej miestnosti je pravidelne kontrolovaný a monitorovaný (napr. denne, týždenne, štvrťročne) z hľadiska počtu častíc, životaschopných počtov, teploty a vlhkosti. HEPA filtre sa používajú na kontrolu počtu častíc vo vzduchu a majú schopnosť odfiltrovať častice až do veľkosti 0,2 µm. Tieto filtre sú zvyčajne udržiavané nepretržite v prevádzke pri kalibrovanom prietoku, aby sa zachovala kvalita vzduchu v miestnosti. Vlhkosť sa zvyčajne udržiava na nízkej úrovni, aby sa zabránilo množeniu mikroorganizmov, ako sú baktérie a plesne, ktoré uprednostňujú vlhké prostredie.

V skutočnosti je najvyššou úrovňou a najbežnejším zdrojom kontaminácie v čistých priestoroch operátor.

Zdroje a vstupné cesty kontaminácie sa v jednotlivých odvetviach výrazne nelíšia, medzi odvetviami však existujú rozdiely z hľadiska tolerovateľných a netolerovateľných úrovní kontaminácie. Napríklad výrobcovia požívateľných tabliet nemusia udržiavať rovnakú úroveň čistoty ako výrobcovia injekčných liekov, ktoré sa priamo zavádzajú do ľudského tela.

Farmaceutickí výrobcovia majú nižšiu toleranciu voči mikrobiálnej kontaminácii ako výrobcovia high-tech elektroniky. Výrobcovia polovodičov, ktorí vyrábajú mikroskopické produkty, nemôžu akceptovať akúkoľvek kontamináciu časticami, aby zabezpečili funkčnosť produktu. Tieto spoločnosti sa preto obávajú iba sterility produktu, ktorý sa má implantovať do ľudského tela, a funkčnosti čipu alebo mobilného telefónu. Relatívne menej sa obávajú plesní, húb alebo iných foriem mikrobiálnej kontaminácie v čistých priestoroch. Na druhej strane sa farmaceutické spoločnosti obávajú všetkých živých a mŕtvych zdrojov kontaminácie.

Farmaceutický priemysel je regulovaný FDA a musí prísne dodržiavať predpisy správnej výrobnej praxe (GMP), pretože dôsledky kontaminácie vo farmaceutickom priemysle sú veľmi škodlivé. Výrobcovia liekov musia nielen zabezpečiť, aby ich produkty neobsahovali baktérie, ale musia mať aj dokumentáciu a sledovanie všetkého. Spoločnosť zaoberajúca sa špičkovými technológiami môže dodávať notebook alebo televízor, pokiaľ prejde interným auditom. Pre farmaceutický priemysel to však nie je také jednoduché, a preto je pre spoločnosť kľúčové mať, používať a dokumentovať prevádzkové postupy v čistých priestoroch. Z dôvodu nákladov si mnohé spoločnosti najímajú externé profesionálne čistiace služby na vykonávanie čistiacich služieb.

Komplexný program environmentálneho testovania čistých priestorov by mal zahŕňať viditeľné a neviditeľné častice vo vzduchu. Hoci neexistuje požiadavka, aby všetky kontaminanty v týchto kontrolovaných prostrediach boli identifikované mikroorganizmami. Program environmentálnej kontroly by mal zahŕňať primeranú úroveň bakteriálnej identifikácie extrakcií vzoriek. V súčasnosti existuje veľa metód na identifikáciu baktérií.

Prvým krokom pri identifikácii baktérií, najmä pokiaľ ide o izoláciu čistých priestorov, je metóda Gramovho farbenia, pretože môže poskytnúť interpretačné vodítka k zdroju mikrobiálnej kontaminácie. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia ukáže grampozitívne koky, kontaminácia môže pochádzať od ľudí. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia ukazuje grampozitívne tyčinky, kontaminácia mohla pochádzať z kmeňov odolných voči prachu alebo dezinfekčným prostriedkom. Ak mikrobiálna izolácia a identifikácia ukazuje gramnegatívne tyčinky, zdroj kontaminácie mohol pochádzať z vody alebo akéhokoľvek vlhkého povrchu.

Mikrobiálna identifikácia vo farmaceutických čistých priestoroch je veľmi potrebná, pretože súvisí s mnohými aspektmi zabezpečenia kvality, ako sú biologické testy vo výrobných prostrediach; testovanie bakteriálnej identifikácie konečných produktov; nemenované organizmy v sterilných produktoch a vode; kontrola kvality technológie fermentačného skladovania v biotechnologickom priemysle; a overenie mikrobiálneho testovania počas validácie. Metóda FDA, ktorá potvrdzuje, že baktérie môžu prežiť v špecifickom prostredí, bude čoraz bežnejšia. Keď úrovne mikrobiálnej kontaminácie prekročia stanovenú úroveň alebo výsledky testu sterility naznačujú kontamináciu, je potrebné overiť účinnosť čistiacich a dezinfekčných prostriedkov a vylúčiť identifikáciu zdrojov kontaminácie.

Existujú dva spôsoby monitorovania povrchov čistých priestorov:

1. Kontaktné dosky

Tieto špeciálne kultivačné misky obsahujú sterilné rastové médium, ktoré je pripravené tak, aby bolo vyššie ako okraj misky. Kryt kontaktnej platne pokrýva povrch, z ktorého sa má odobrať vzorka, a všetky mikroorganizmy viditeľné na povrchu priľnú k povrchu agaru a inkubujú sa. Táto technika môže ukázať počet mikroorganizmov viditeľných na povrchu.

2. Metóda výteru

Toto je sterilné a skladované vo vhodnej sterilnej tekutine. Tampón sa aplikuje na testovaný povrch a mikroorganizmus sa identifikuje tak, že sa tampón získa z média. Tampóny sa často používajú na nerovných povrchoch alebo v oblastiach, ktoré sa ťažko odoberajú pomocou kontaktnej platne. Odber vzoriek tampónu je skôr kvalitatívny test.


Čas odoslania: 21. októbra 2024