1. Účel: Cieľom tohto postupu je poskytnúť štandardizovaný postup pre aseptické operácie a ochranu sterilných miestností.
2. Rozsah uplatňovania: laboratórium biologického testovania
3. Zodpovedná osoba: Tester supervízorov QC
4. Definícia: Žiadne
5. Bezpečnostné opatrenia
Prísne vykonávať aseptické operácie, aby sa zabránilo mikrobiálnej kontaminácii; Pred vstupom do sterilnej miestnosti by operátori mali vypnúť UV žiarovku.
6.
6.1. Sterilná miestnosť by mala byť vybavená sterilnou operačnou miestnosťou a nárazníkovou miestnosťou. Čistota sterilnej operačnej miestnosti by mala dosiahnuť triedu 10000. Vnútorná teplota by sa mala udržiavať pri 20-24 ° C a vlhkosť by sa mala udržiavať na 45-60%. Čistota čistej lavičky by mala dosiahnuť triedu 100.
6.2. Sterilná miestnosť by sa mala udržiavať v čistote a je prísne zakázané hromadiť zvyšky, aby sa zabránilo kontaminácii.
6.3. Prísne zabrániť kontaminácii všetkých sterilizačných zariadení a kultúrnych médií. Tí, ktorí sú kontaminovaní, by ich mali prestať používať.
6.4. Sterilná miestnosť by mala byť vybavená dezinfekčnými prostriedkami z pracovnej koncentrácie, ako je 5% roztok Cresol, 70% alkoholu, 0,1% roztok chlormetionínu atď.
6.5. Sterilná miestnosť by sa mala pravidelne sterilizovať a čistiť primeraným dezinfekčným prostriedkom, aby sa zabezpečilo, že čistota sterilnej miestnosti spĺňa požiadavky.
6.6. Všetky nástroje, nástroje, jedlá a iné predmety, ktoré je potrebné priviesť do sterilnej miestnosti, by mali byť pevne zabalené a sterilizované príslušnými metódami.
6.7. Pred vstupom do sterilnej miestnosti musí personál umyť ruky mydlom alebo dezinfekčným prostriedkom a potom sa pred vstupom do sterilnej miestnosti vymení na špeciálne pracovné odevy, klobúky, masky a rukavice v nárazníkovej miestnosti (alebo znova utrite ruky 70% etanolom). Vykonajte operácie v bakteriálnej komore.
6.8. Pred použitím sterilnej miestnosti musí byť ultrafialová lampa v sterilnej miestnosti zapnutá na ožarovanie a sterilizáciu na viac ako 30 minút a čistá lavica sa musí zapnúť, aby sa súčasne vyhodil vzduch. Po dokončení operácie by sa mala sterilná miestnosť vyčistiť v čase a potom sterilizovať sa ultrafialovým svetlom na 20 minút.
6.9. Pred kontrolou by sa vonkajšie balenie skúšobnej vzorky malo udržiavať nedotknuté a nesmie sa otvoriť, aby sa zabránilo kontaminácii. Pred kontrolou použite 70% alkoholových bavlnených guličiek na dezinfekciu vonkajšieho povrchu.
6.10. Počas každej operácie by sa malo vykonať negatívna kontrola, aby sa skontrolovala spoľahlivosť aseptickej prevádzky.
6.11. Pri absorbovaní bakteriálnej kvapaliny musíte na jej absorpciu použiť saciu guľu. Nedotýkajte sa slamy priamo ústami.
6.12. Ozdobná ihla musí byť sterilizovaná plameňom pred a po každom použití. Po ochladení môže byť kultúra naočkovaná.
6.13. Slamky, testovacie trubice, Petriho misky a ďalšie riady obsahujúce bakteriálnu tekutinu by sa mali namočiť v sterilizačnej vedre obsahujúcej 5% roztok lyzolu na dezinfekciu a vytiahnuté a vypláchnuté po 24 hodinách.
6.14. Ak je na stole alebo podlahe vyliatá bakteriálna tekutina, mali by ste okamžite naliať 5% roztok kyseliny karbolovej alebo 3% lyzol na kontaminovanú oblasť najmenej 30 minút pred jeho ošetrením. Ak sú pracovné odevy a klobúky kontaminované bakteriálnou tekutinou, mali by sa okamžite odobrať a po vysokej tlakovej sterilizácii pary sa premyjú.
6.15. Všetky položky obsahujúce živé baktérie musia byť dezinfikované pred opláchnutím pod kohútikom. Je prísne zakázané znečisťovať kanalizáciu.
6.16. Počet kolónií v sterilnej miestnosti by sa mal skontrolovať mesačne. Pri otvorenej lavičke si vezmite množstvo sterilných Petriho misiek s vnútorným priemerom 90 mm a asepticky vstrekujte asi 15 ml média výživného agarového kultivačného média, ktoré sa roztopilo a ochladilo na približne 45 ° C. Po tuhnutí ho umiestnite hore nohami na 30 až 35 inkubátu 48 hodín v inkubátore ℃. Po preukázaní sterility vezmite 3 až 5 dosiek a položte ich na ľavú, strednú a pravú po pracovnej pozícii. Po otvorení krytu a ich odhalení po dobu 30 minút ich umiestnite hore nohami do inkubátora 30 až 35 ° C na 48 hodín a vyberte ich. preskúmať. Priemerný počet rôznych baktérií na doske v čistej ploche triedy 100 nesmie prekročiť 1 kolóniu a priemerné číslo v čistej miestnosti triedy 10000 nesmie prekročiť 3 kolónie. Ak je limit prekročený, sterilná miestnosť by mala byť dôkladne dezinfikovaná, kým opakované inšpekcie nespĺňajú požiadavky.
7. Pozri kapitolu (metóda inšpekcie sterility) v „metódach hygienickej kontroly liekov“ a „Čína štandardné prevádzkové postupy pre kontrolu liekov“.
8. Oddelenie distribúcie: Oddelenie riadenia kvality
Technické vedenie čistej miestnosti:
Po získaní sterilného prostredia a sterilných materiálov musíme udržiavať sterilný stav, aby sme mohli študovať špecifický známy mikroorganizmus alebo využiť ich funkcie. V opačnom prípade sa rôzne mikroorganizmy zvonka môžu ľahko premiešať. Fenomén miešania irelevantných mikroorganizmov zvonku sa v mikrobiológii nazýva kontaminujúce baktérie. Prevencia kontaminácie je kritickou technikou v mikrobiologickej práci. Kompletná sterilizácia na jednej strane a prevencia kontaminácie na druhej strane sú dva aspekty aseptickej techniky. Okrem toho musíme zabrániť štúdiám mikroorganizmov, najmä patogénnych mikroorganizmov alebo geneticky skonštruovaných mikroorganizmov, ktoré v prírode neexistujú, z uniknutia z našich experimentálnych kontajnerov do vonkajšieho prostredia. Na tieto účely existuje v mikrobiológii veľa opatrení.
Sterilná miestnosť je zvyčajne malá miestnosť špeciálne zriadená v mikrobiologickom laboratóriu. Môže byť postavený s plachtami a sklenením. Táto oblasť by nemala byť príliš veľká, asi 4 až 5 metrov štvorcových a výška by mala byť asi 2,5 metra. Mifalúrová miestnosť by mala byť postavená pred sterilnou miestnosťou. Dvere nárazníkovej miestnosti a dvere sterilnej miestnosti by nemali čeliť rovnakým smerom, aby sa zabránilo tomu, aby prúdenie vzduchu priniesli rôzne baktérie. Sterilná miestnosť aj nárazová miestnosť musia byť vzduchotesné. Vnútorné ventilačné zariadenie musí mať zariadenia na filtráciu vzduchu. Podlaha a steny sterilnej miestnosti musia byť plynulé, ťažko obsahovať nečistoty a ľahko sa čistí. Pracovná plocha by mala byť na úrovni. Sterilná miestnosť aj nárazová miestnosť sú vybavené ultrafialovými svetlami. Ultrafialové svetlá v sterilnej miestnosti sú vzdialené 1 meter od pracovnej plochy. Zamestnanci vstupujúci do sterilnej miestnosti by mali nosiť sterilizované oblečenie a klobúky.
V súčasnosti v mikrobiologických továrniach väčšinou existujú sterilné miestnosti, zatiaľ čo všeobecné laboratóriá používajú čistú lavicu. Hlavnou funkciou čistej lavičky je použitie laminárneho zariadenia na prietok vzduchu na odstránenie rôznych drobných prachu vrátane mikroorganizmov na pracovnej ploche. Elektrické zariadenie umožňuje vzduchu vzduchom cez filter HEPA a potom vstúpiť do pracovnej plochy, takže pracovný povrch je vždy držaný pod kontrolou tečúceho sterilného vzduchu. Okrem toho je na boku vysokorýchlostná vzduchová opona blízko vonkajšej strany, aby sa zabránilo vstupu vonkajšieho bakteriálneho vzduchu.
V miestach s ťažkými podmienkami je možné namiesto čistej lavičky použiť drevené sterilné škatule. Sterilná škatuľka má jednoduchú štruktúru a ľahko sa pohybuje. Na prednej časti škatule sú dva otvory, ktoré sú blokované push-pull dvere, keď nie sú v prevádzke. Počas prevádzky môžete rozšíriť svoje ruky. Horná časť prednej časti je vybavená sklom na uľahčenie vnútornej prevádzky. Vo vnútri je ultrafialová lampa a riady a baktérie môžu byť vložené cez malé dvere na boku.
Aseptické prevádzkové techniky v súčasnosti hrajú nielen kľúčovú úlohu v mikrobiologickom výskume a aplikáciách, ale tiež sa používajú aj v mnohých biotechnológiách. Napríklad transgénna technológia, technológia monoklonálnej protilátky atď.
Čas príspevku: mar-06-2024